干細(xì)胞培養(yǎng)基作用與存放要求

　　干細(xì)胞培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)的核心成分，其作用是為干細(xì)胞提供必要的營養(yǎng)、生長因子、pH緩沖和無菌環(huán)境，以維持細(xì)胞的存活、增殖和分化。

　　一、干細(xì)胞培養(yǎng)基的作用：

　　提供基礎(chǔ)營養(yǎng)：

　　氨基酸、糖類、維生素：為細(xì)胞代謝提供能量和原料。

　　無機(jī)鹽：維持滲透壓和離子平衡。

　　支持細(xì)胞生長與增殖：

　　血清（如FBS胎牛血清）：提供生長因子、激素、脂蛋白等，促進(jìn)細(xì)胞貼壁和增殖。

　　重組生長因子：誘導(dǎo)干細(xì)胞自我更新，抑制分化。

　　維持pH穩(wěn)定：

　　通過緩沖系統(tǒng)中和代謝產(chǎn)生的酸性物質(zhì)，保持培養(yǎng)基pH在7.2~7.4范圍內(nèi)。

　　防止污染：

　　添加抗生素預(yù)防細(xì)菌污染（注意：長期使用可能影響細(xì)胞狀態(tài)）。

　　培養(yǎng)基本身需無菌，通常經(jīng)過過濾除菌。

　　調(diào)節(jié)滲透壓：

　　通過電解質(zhì)濃度控制滲透壓，避免細(xì)胞因滲透壓失衡而破裂或皺縮。

　　支持特定細(xì)胞需求：

　　根據(jù)干細(xì)胞類型（如胚胎干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞）添加特異性成分。

　　二、干細(xì)胞培養(yǎng)基存放要求：

　　1. 未開封培養(yǎng)基的存放

　　低溫保存：

　　基礎(chǔ)培養(yǎng)基應(yīng)存放于4℃冰箱，避免反復(fù)凍融。

　　添加血清或生長因子后的培養(yǎng)基需根據(jù)成分調(diào)整：

　　含血清的培養(yǎng)基：短期可存于4℃，長期（>1周）需-20℃冷凍，使用前解凍。

　　無血清培養(yǎng)基：建議小量分裝，4℃保存（部分需-20℃）。

　　避光保存：

　　某些成分（如谷氨酰胺、生長因子）對光照敏感，需用錫箔紙包裹或存放在深色容器中。

　　保質(zhì)期限制：

　　基礎(chǔ)培養(yǎng)基開封后建議1個月內(nèi)用完，含血清的培養(yǎng)基最好2周內(nèi)使用。

　　2. 配制后培養(yǎng)基的存放

　　無菌操作：

　　配制時在超凈臺內(nèi)完成，避免微生物污染。

　　分裝至無菌容器（如培養(yǎng)瓶、離心管），密封后標(biāo)記配制日期。

　　短期存放：

　　4℃保存，不超過1周（含血清培養(yǎng)基）。

　　無血清培養(yǎng)基可存于4℃或按說明書要求冷凍。

　　長期存放：

　　冷凍，使用前需緩慢解凍。

　　3. 特殊注意事項

　　避免反復(fù)凍融：

　　凍融會導(dǎo)致血清蛋白變性、生長因子失活，建議分裝成單次用量后冷凍。

　　禁止陽光直射：

　　存放位置遠(yuǎn)離窗戶或強(qiáng)光，防止光敏成分降解。

　　定期檢查：

　　觀察培養(yǎng)基是否渾濁、沉淀或變色，若出現(xiàn)異常則丟棄。